Použitie modelu obéznych samíc potkanov kmeňa Zucker (ZDF) pred a po ovariektómii a vzoriek plazmy diabetických pacientiek rôzneho reprodukčného veku.
Model menopauzy indukovanej ovariektómiou
po dosiahnutí 16 týždňov budú samice potkanov ZDF podrobené bilaterálnej ovariektómii pomocou rezu v stredovej línii, slepo operované zvieratá podstúpia celý chirurgický zákrok okrem odstránenia vaječníkov
Krvný tlak a srdcová frekvencia
stanovené metódou chvostovej manžety u potkanov vopred vytrénovaných na meranie
Základné parametre metabolizmu glukózy
stanovenie hladiny glukózy v krvi a inzulínu budú monitorované pred a po jedle/ orálny glukózový tolerančný test, ELISA
Základné parametre metabolizmu lipidov a parametre poškodenia obličiek a srdca v plazme
stanovenie triglyceridov, celkového cholesterolu, HDL a LDL, cholesterolu, neesterifikovaných mastných kyselín, kreatinínu, močoviny, kyseliny močovej, albumínov, aspartátaminotransferázy atď./ biochemický analyzátor
Prozápalové a protizápalové faktory, adipocytokíny a vazodilatačné faktory v plazme
stanovenie rôznych adipocytokínov, zápalových a vazodilatačných faktorov (hsCRP, MCP-1, TNFα, IL-6, leptín, chemerín, cGMP atď.)/ELISA
Hladina H2S
stanovenie koncentrácie H2S v plazme a cievnom tkanive/metóda metylénovej modrej, H2S senzor založený na elektródovej technológii
Aktivita NO-syntázy
stanovenie aktivity NO-syntázy v tkanivách kardiovaskulárneho systému/metóda konverzie značeného[3H]-L-arginínu na L-citrulín pomocou scintilačného analyzátora
Kvantifikácia angiotenzínov v plazme
komplexná biochemická charakterizácia cirkulujúcich zložiek renín angiotenzínového systému v spolupráci s Attoquant Diagnostics/RAS-Fingerprint™
Meranie aktivít a koncentrácie proteáz
stanovenie aktivity ACE2 a koncentrácie sACE2, ADAM17 a TMPRSS2 vo vzorkách plazmy a tkaniva/fluorometriia, ELISA .
Funkčné štúdie
integrovaná odozva krvného tlaku in vivo po akútnej aplikácii vazopresorových a vazodepresorových látok pôsobiacich na jednotlivé signálne dráhy/ senzor krvného tlaku zavedený do a. carotis
zmeny prietoku krvi v cieve zásobujúcej vybranú oblasť (napr. renálna artéria)/perivaskulárny prietokový systém
vazoaktívne odpovede izolovaných artérií s cieľom vyhodnotiť cievne poškodenie – endotelová dysfunkcia, porucha kontraktility a perivaskulárneho tukového tkaniva/tenzometria, myografia
Genomická a proteomická analýza
analýza arteriálnej steny a perivaskulárneho tukového tkaniva – analýza expresie génov a proteínov vazoaktívnych a zápalových faktorov, faktorov lipidového metabolizmu ako aj ďalších faktorov zapojených do rôznych signálnych dráh/RT qPCR, Western blot analýza, vizualizácia pomocou imunofluorescencie
Oxidačný stres
meranie produkcie superoxidu v tkanivách aorty a ľavej srdcovej komory/ chemiluminiscencia zosilnená lucigenínom
stanovenie konjugovaných diénov/spektorfotometria
Vzorky pacientiek
vzorky plazmy odoberané od náhodne vybraných pacientiek II. internej kliniky Univerzitnej nemocnice v Bratislave, hlavné kritérium – diagnostikovaný diabetes II. typu
stanovenie plazmatickej hladiny vybraných parametrov (hladina H2S, lipidový profil, zápalové faktory, markery poškodenia srdca a obličiek atď.) u diabetických pre- a postmenopauzálnych pacientiek